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當前位置:首頁新聞中心pG6質粒簡介,pG6質粒說明

pG6質粒簡介,pG6質粒說明

更新時間:2013-03-12點擊次數:1717

pG6質粒是噬菌體顆粒載體,是為融合蛋白的單價展示設計的。來自輔助噬菌體的野生型pⅥ與噬菌體顆粒載體表達的pⅥ-cDNA的融合蛋白競爭合成原始的噬菌體顆粒。在多鏈接區域除了有一個額外的SalI位點以外,實際上噬菌體顆粒載體pG6A、pG6B、pG6C與載體pDONG6是等同的,pDONG6允許在gⅥ的3’末端進行eDNA文庫克隆。從lac啟動子轉錄可以產生雙側順反子mRNA:*條順反子在lacZ和gⅢ3’末端之間編碼一個融合蛋白,而第二條順反子包含了gⅥ-eDNA融合基因。gⅥ的核糖體結合位點控制著第二條順頃反子的翻譯,此位點位于gⅢ的3’末端。盡管盧-異丙基硫代半乳糖苷可誘導1ac啟動子控制gⅥ-cDNA的表達,但是我們已經利用1ac啟動子的滲漏性(在缺乏葡萄糖的條件下)來指導噬菌體展示的gⅥ融合蛋白的表達。

用于噬菌體展示編碼cDNA產物的pG6家族載體環狀圖(a)和序列(b)。
此載體的原型是插人M13噬菌體基因Ⅵ的pUCll9載體。此系列的pG6載體能夠在基因Ⅵ閱讀框下游SfiⅠ與NotⅠ酶切之間的cDNA的大量克隆。該圖已得到Nature America公司的授權

 

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